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拜赖青霉对烟草黑胫病与根结线虫具备良好生防效果

2026-07-14T10:25:35 作者:超级管理员 来源:本站
拜赖青霉对烟草黑胫病与根结线虫具备良好生防效果
初农生物2026年06月12日 10:48

烟草黑胫病、根结线虫病是烟草生产中危害严重的土传病害,两类病害常混合发生,严重影响烟草长势与产量。当前农业生产多依赖化学药剂进行防治,易引发农药残留、病原菌和线虫抗药性等问题,生物防治成为绿色防控的重要发展方向。有相关研究从烟田土壤中筛选出拜赖青霉菌株,试验证实该菌株可同时防控烟草黑胫病与根结线虫病,是极具应用价值的生防微生物。

一、菌株来源与种类鉴定

研究于2023年7月,在湖南郴州烟草黑胫病高发区域,采集健康烟株根际土壤作为试验样本。研究人员采用 土壤原位平板培养法 ,以烟草疫霉为靶标病原菌,最终筛选获得1株具有拮抗作用的真菌,编号为 LYQ01

结合菌落形态、分生孢子特征开展初步判定,该菌株符合青霉属典型特征。再通过18S-ITS序列扩增测序并进行序列比对,结果显示LYQ01与拜赖青霉( Penicillium bilaiae )序列匹配率达 99.65%

研究进一步参照拜赖青霉标准菌株ATCC 20851的全基因组数据,设计引物扩增出4条与次级代谢产物合成相关的基因片段,片段总长度约6 kb,测序比对后相似性达到 99.9% 。综合形态特征与分子生物学鉴定结果,最终确定菌株LYQ01为拜赖青霉。

二、对烟草黑胫病(烟草疫霉)的拮抗效果

烟草黑胫病由烟草疫霉侵染引发,研究通过 平板对峙、发酵液抑菌、提取物抑菌、共培养 多项试验,全面验证拜赖青霉LYQ01的抑菌能力。

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平板对峙试验

拜赖青霉LYQ01可明显抑制烟草疫霉菌丝生长,平板上形成清晰抑菌圈,直观体现出菌株的拮抗作用。

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不同浓度发酵液抑菌试验

抑菌效果随发酵液浓度升高逐步增强,具体数据如下:

发酵液浓度1%:几乎无抑菌效果,抑菌率仅0.8%
发酵液浓度5%:开始呈现明显抑菌作用,抑菌率44.7%
发酵液浓度15%:抑菌率达66.7%
发酵液浓度30%:抑菌率高达92.7%,疫霉菌丝生长基本被抑制
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活性提取物抑菌试验

利用乙酸乙酯对发酵液进行萃取得到活性提取物,该物质对烟草疫霉存在抑制效果,但整体作用弱于发酵原液。

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谷子培养基共培养试验

将拜赖青霉与烟草疫霉共同接种培养后,烟草疫霉无法正常生长,拜赖青霉占据绝对生长优势。

研究证实,拜赖青霉分泌的挥发性、非挥发性代谢产物以及水解酶,是抑制烟草疫霉生长的核心物质。

三、对根结线虫的抑杀效果

试验设置两类PDA发酵液、乙酸乙酯提取物、阳性对照药剂吡啶二羧酸等组别,测定拜赖青霉产物对根结线虫的致死能力,并统计死亡率与校正死亡率。

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不同培养基发酵液效果对比

培养基成分直接影响菌株杀线活性:
不含蛋白胨PDA发酵液原液:处理48 h,根结线虫校正死亡率为44.01%
含蛋白胨PDA发酵液原液:处理24 h校正死亡率90.90%,处理48 h校正死亡率93.50%

试验证明,培养基中的蛋白质可有效促进拜赖青霉产生活性杀线物质。

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提取物与对照药剂效果
乙酸乙酯提取物:经50倍、100倍稀释后,对线虫抑杀效果十分微弱;
吡啶二羧酸(对照药剂):原液对线虫致死率100%,但稀释后抑杀效果快速下降。

综合试验结果可知,拜赖青霉发酵原液中的 酶类与代谢产物协同作用 ,是灭杀根结线虫的关键。

四、总结

拜赖青霉LYQ01可同时抑制烟草疫霉、灭杀根结线虫,对烟草黑胫病、根结线虫病均具备优异的生物防治效果。该菌株碳源选择广泛、耐酸性特征适配工业化生产,配套遗传操作体系也已明确,是烟草土传病害绿色防控的优质生防资源,拥有良好的应用前景。


引用来源 :曾祥难,刘新源,彭博,谢冰悦,杨英杰,尤祥伟,李义强,韦建玉.烟草疫霉拮抗菌的分离鉴定及其生防和发酵特性[J].江苏农业科学,2024,52(16):161-170.