操作步骤如下：

1.液体石蜡的准备
选用优良化学纯液体石蜡，将液体石蜡分装加塞，用牛皮纸包好，采用以下两种方式进行灭菌：
121℃湿热灭菌30min，置40℃恒温箱中蒸发水分，经无菌检查后备用。
160℃干热灭菌2个小时，冷却后，经无菌检查后备用。

2.斜面培养物的制备
参照定期移植法。

3.灌注石蜡
将无菌的液体石蜡在无菌条件下注入培养好的新鲜斜面培养物上，液面高出斜面顶部1cm左右，使菌体与空气隔绝。

4.保藏
①注入液体石蜡的菌种斜面以直立状态置低温（4～6℃）干燥处保藏，保藏时间2～10年。
②保藏期间应定期检查，如培养基露出液面，应及时补充无菌的液体石蜡。

5.恢复培养
恢复培养时，挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上，生长繁殖后，再重新转接一次。